【摘 要】
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目的 观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低PIK3R1、AKT1表达后在体外对胃腺癌SGC7901细胞侵袭的抑制作用。方法将重组腺病毒质粒表达载体rAd5-A—P转染至SGC7901细胞。RealtimePCR和Westernblot分别检测转染前后目的基因mRNA和蛋白的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞外基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的浓度变化。划痕、Transwel
【机 构】
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目的 观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低PIK3R1、AKT1表达后在体外对胃腺癌SGC7901细胞侵袭的抑制作用。方法将重组腺病毒质粒表达载体rAd5-A—P转染至SGC7901细胞。RealtimePCR和Westernblot分别检测转染前后目的基因mRNA和蛋白的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞外基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的浓度变化。划痕、Transwell、3-D Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果rAd5-A-P可以有效抑制PIK3R1、AKTI的表达，MMP-2、MMP-9表达下调，基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-2表达上调，ELISA证实细胞外MM9-2、MMP-9浓度在治疗组明显减低。划痕实验显示rAd5-A—P转染组细胞转移运动能力明显减弱，Transwell穿过细胞数结果：对照组（105．0．4-4．0）和无义序列组（102．5±6．4），rAd5-A．P转染组（67．0±3．9），3-D的Matrigel基质生长实验显示与对照组和无义序列组比较，rAd5-A—P转染组细胞形成的细胞团块较小。结论靶向AKT1、PIK3R1的RNAi技术可以序列特异性地抑制PIK3R1、AKT1表达，在体外明显抑制SGC7901细胞的侵袭能力。
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