【摘 要】
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目的：利用细胞、分子生物学技术，采用病理观察星形胶质细胞形态学改变、免疫荧光、实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（Real-time PCR，RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot，WB）检测方法研究针刺对脑缺血再灌注大鼠脑区星形胶质细胞的影响。方法: 选取SD级别雌性大鼠18只，应用随机数值表法将其分成3组，每组6只，即假手术组、模型组、电针组。除假手术组外，采用Longa改良线栓
【基金项目】
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辽宁省教育厅重点攻关项目L202065； 辽宁省针灸养生康复重点实验室18-006-0-06； 2021年辽宁中医药大学大学生创新训练计划项目国家级立项编号：202110162015；
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目的：利用细胞、分子生物学技术，采用病理观察星形胶质细胞形态学改变、免疫荧光、实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（Real-time PCR，RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot，WB）检测方法研究针刺对脑缺血再灌注大鼠脑区星形胶质细胞的影响。方法: 选取SD级别雌性大鼠18只，应用随机数值表法将其分成3组，每组6只，即假手术组、模型组、电针组。除假手术组外，采用Longa改良线栓法建立大鼠CIRI模型，评定造模成功后，分别给予电针干预治疗。对各组大鼠进行采用动物神经功能进行评分及神经行为学测试，进行HE染色观察脑组织病理改变，免疫荧光检测各组星形胶质细胞GFAP、PPARγ表达情况，Real-time PCR检测各组星形胶质细胞miR-21表达情况 ，Western blot检测各组星形胶质细胞PI3K、AKT蛋白表达情况，采用SPSS 22.0软件包对RT-PCR、WB法检测结果进行方差分析，P＜0.05有统计学意义。结果: （1）神经行为学检查Longa评分法结果：经过电针治疗后的大鼠Longa评分均降低，经与假手术组比较，其结果具有统计学意义（P＜0.05）。（2）Morris水迷宫实验结果显示：与假手术组比较可知，模型组大鼠穿越逃生平台次数成下降趋势（P＜0.05）;经过治疗后，电针组较模型组穿越逃生平台的次数增加显著（ P＜0.05）。（3）脑组织病理切片结果:电针组大鼠脑组织损伤情况缓解最为显著。（4）免疫荧光检测结果：电针较模型组星形胶质细胞数量增多（P＜0.05），模型组较假手术组PPARγ阳性表达减弱（P＜ 0.05），电针组较模型组PPARγ阳性表达增多（P＜0.05）。（5）实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测结果: 模型组对比于假手术组其miR-21的数值表达呈现上涨趋势（P＜0.05），电针组的大鼠对比于模型组表达呈现升高趋势（P＜0.05）。（6） 蛋白免疫印迹检测结果:模型组PI3K/AKT蛋白的表达较假手术组呈现上调的趋势（P＜0.05）。电针治疗干预后，与模型组相比，电针组PI3K、AKT蛋白表达出现上调趋势更为明显（P＜0.05）。结论: 电针治疗可上调PPARγ表达，活化miR-21激活PI3K/AKT信号通路表达，保护因脑缺血再灌注导致损伤的神经元，使其修复与再生，来降低脑缺血再灌注带来的不良后果。
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