【摘 要】
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目的探讨组蛋白甲基化转移酶EZH1/2在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的表达变化规律及EZH2选择性抑制剂DZNep对EZH1/2在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中表达的影响。方法通过体
【机 构】
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湖北医药学院附属人民医院生殖医学中心、生物医学工程学院、胚胎干细胞湖北省重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:31671565);湖北省自然科学基金项目(编号:2015CFB543);湖北医药学院优秀中青年科技创新团队资助计划项目(编号:2014CXX03);湖北医药学院校基金立项资助项目(编号:FDFR201604)
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目的探讨组蛋白甲基化转移酶EZH1/2在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的表达变化规律及EZH2选择性抑制剂DZNep对EZH1/2在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中表达的影响。方法通过体外培养小鼠子宫内膜基质细胞,小鼠子宫内膜基质细胞生长到80%90%时进行雌孕激素诱导蜕膜化及加抑制剂处理分成以下4组,对照组:2%FBS/DMEM（含P/S）;蜕膜化组:加入含有E2（10 nmol/L）+P4（1μmol/L）的2%FBS/DMEM（含P/S）;抑制剂（DZNep）组:加入含有DZNep（20μmol/L）的2%FBS/DMEM（含P/S）;蜕膜化加抑制剂组:加入含有DZNep（20μmol/L）+E2+P4的2%FBS/DMEM（含P/S）,0、24、48、72 h拍照,48 h换液,72 h收细胞。利用免疫荧光化学及Real-time PCR方法从蛋白和mRNA水平检测EZH1/2在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的表达。结果 （1）小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化72 h中EZH1/2基因的表达明显上调,蜕膜化组与对照组相比差异有统计学意义（P <0. 05）;（2）蜕膜化联合抑制剂组与对照组相比,抑制剂组可以促进EZH1mRNA和EZH2 mRNA的表达,差异有统计学意义（P <0. 05）;与蜕膜化组相比,蜕膜化加抑制剂组EZH1 mRNA和EZH2 mRNA的表达上调,差异有统计学意义（P <0. 05）;（3） DZNep联合蜕膜化处理抑制EZH2蛋白的表达,但促进EZH1蛋白的表达。结论 （1） EZH1/2基因参与m ESC蜕膜化过程;（2）DZNep单独可以促进小鼠子宫基质细胞蜕膜化;（3）在小鼠子宫内膜蜕膜化细胞中,DZNep在转录水平可以促进EZH1/2 mRNA的表达,在蛋白水平抑制EZH2的表达、促进EZH1的表达。
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