下调lncRNA OIP5-AS1可通过miR-217/USP7轴抑制肝癌细胞EMT及侵袭迁移

来源 :邵阳学院学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jmgxy
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目的 探究lncRNA OIP5-AS1/miR-217/USP7分子轴对肝癌细胞EMT和侵袭迁移的调控作用。方法 选取正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞系(MHCC97H,Hep3B,HepG2和HCCLM3),实时荧光定量PCR法检测正常肝细胞和肝癌细胞系中lncRNA OIP5-AS1的表达水平,Transwell实验检测肝癌细胞在下调lncRNA OIP5-AS1的表达后其侵袭和迁移能力的变化,蛋白质印迹实验检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白E-cadherin, N-cadherin和Vimentin的表达情况。通过生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验预测并验证lncRNA OIP5-AS1、miR-217和USP7的靶向关系,蛋白质印迹和Transwell实验检测LncRNA OIP5-AS1/miR-217/USP7分子轴对肝癌细胞EMT和侵袭迁移能力的影响。结果 lncRNA OIP5-AS1在肝癌细胞系中均明显高表达(P<0.05或P<0.01)。下调肝癌细胞中lncRNA OIP5-AS1的表达可明显抑制肝癌细胞EMT及侵袭迁移(P<0.05);lncRNA OIP5-AS1靶向结合miR-217,且USP7是miR-217的靶基因(P<0.05);进一步研究证实,IncRNA OIP5-AS1通过miR-217上调USP7的表达水平,从而促进肝癌细胞的EMT和侵袭迁移(P<0.05或P<0.01)。结论 IncRNA OIP5-AS1通过靶向miR-217/USP7分子轴促进肝癌细胞的EMT和侵袭迁移。
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