大鼠肝脏F蛋白基因的克隆和表达

来源 :同济大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kukuhenku
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目的 获得大鼠肝脏F蛋白基因克隆(F-protein 's cDNA),利用原核(大肠杆菌)表达系统表达大鼠肝脏F蛋白. 方法提取大鼠肝脏总RNA,对其进行反转录和PCR(RT-PCR)扩增出目的基因(F-protein's cDNA),然后将其与pUCm-T载体进行连接获得克隆质粒pUCm-T- F并转化到大肠杆菌DH5α中,将测序结果正确的克隆片断重新与表达载体pET-15b连接,获得F抗原表达质粒pET15b-F并将其转化到表达菌株BL21(DE3)pLysS中,用1 mmol/L IPTG诱导其表
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