【摘 要】
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目的:克隆、表达猪链球菌2型四川人源分离株ZYH24细胞外蛋白因子基因片段,分析蛋白活性。方法:根据GenBank S.suis 2 epf基因序列设计引物,克隆ZYH24株epf基因片段并进行序列分析
【机 构】
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南京军区军事医学研究所,南京农业大学动物医学院
【基金项目】
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本文受国家“十五”重大传染病科技攻关课题(No.2003BA712A03-05)、国家自然科学基金(No.30600533)和江苏省自然科学基金(No.BK2006014)资助
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目的:克隆、表达猪链球菌2型四川人源分离株ZYH24细胞外蛋白因子基因片段,分析蛋白活性。方法:根据GenBank S.suis 2 epf基因序列设计引物,克隆ZYH24株epf基因片段并进行序列分析;构建原核表达质粒pGEX4T-2-epf,在大肠杆菌中诱导带有谷胱苷肽转移酶(GST)标签的融合蛋白EF-GST的表达;亲和层析法纯化融合蛋白EF-GST,用凝血酶切除重组蛋白中的GST,获得纯化的EF抗原;SDS-PAGE和Western blot分析诱导表达及纯化的重组蛋白。结果:序列分析表明,获得的
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