华南HCV 1b亚型NS5A插入式复制子重组质粒的构建和序列分析

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构建来自华南不同慢性丙型肝炎(CHC)患者的HCV NS5A的replicon重组质粒并测序分析,探索HCV NS5A在抗病毒应答中生物学特性。方法 以能够高效复制的1b型HCV replicon质粒为骨架,构成带有MIu Ⅰ 和Bcl Ⅰ 双酶切位点的开关质粒,采用逆转录-聚合酶链反应从不同CHC患者血清中扩增获得HCV 1b亚型NS5A全长片段,克隆到pMD-18载体中,测序分析其中的PKRBD、ISDR、V3和IRRDR区域的变异情况。扩增产物中无MIu Ⅰ 和Bcl Ⅰ 酶切序列的,在引物中引入相
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