Nogo受体慢病毒干扰载体在大鼠神经干细胞中的表达及其干扰效率鉴定

来源 :医学研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：VictorXie

【摘要】

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目的在体外分离培养的大鼠神经干细胞内，通过慢病毒介导的shRNA实现持续稳定的NgR沉默。方法设计并合成表达NgRshRNA的慢病毒载体，通过转染293T细胞系收集包装好的病毒颗粒。分

【作者】

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刘欣春朱悦

【机构】

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中国医科大学附属第一医院骨科

【出处】

：

医学研究杂志

【发表日期】

：

2015年11期

【关键词】

：

NOGO受体神经干细胞慢病毒 NgR Neural stem cell Lentivirus

【基金项目】

：

辽宁省自然科学基金资助项目（2014021062）

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目的在体外分离培养的大鼠神经干细胞内，通过慢病毒介导的shRNA实现持续稳定的NgR沉默。方法设计并合成表达NgRshRNA的慢病毒载体，通过转染293T细胞系收集包装好的病毒颗粒。分离培养初生大鼠脊髓神经干细胞，以不同MOI值感染慢病毒，流式细胞术确定感染所需的最佳MOI值。感染慢病毒的神经干细胞经潮霉素筛选后进行单克隆培养，Westernblot法检测NgR的沉默效率。取感染后不同天数的神经干细胞，实时定量PCR检测NgR沉默的稳定性。结果神经干细胞分离培养6天后可见神经球形成；流式细胞术测定慢病毒感

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