【摘 要】
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试验通过系统比较研究,确立了杜鹃属植物RAPD-PCR的最佳反应体系,即20μL反应体系中:模板DNA(10 g.L-1)1.5μL;10×PCR buffer 2μL;Taq酶(0.5 U.μL-1)0.3μL;引物(0.8μmol
【机 构】
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山西农业大学园艺学院,四川农业大学林学园艺学院 山西太谷030801,四川雅安625014
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试验通过系统比较研究,确立了杜鹃属植物RAPD-PCR的最佳反应体系,即20μL反应体系中:模板DNA(10 g.L-1)1.5μL;10×PCR buffer 2μL;Taq酶(0.5 U.μL-1)0.3μL;引物(0.8μmol.L-1)4μL;MgCl2(25 mmol.L-1)1.8μL;dNTPs(dATP、dCTP、dTTP、dGTP各含1.0 mmol.L-1)0.6μL。经试验验证,该反应体系重复性高,扩增条带亮度均匀,弥散现象少。
In the 20μL reaction system, 1.5μL of template DNA (10 gL-1), 2μL of 10 × PCR buffer, 2μL of Taq enzyme (0.5 U.μL -1); 4 μL of primer (0.8 μmol·L-1); 1.8 μL of MgCl2 (25 mmol.L-1); and 0.6 μL of dNTPs (1.0 mmol.L-1 each of dATP, dCTP, dTTP and dGTP) The experimental verification, the reaction system is highly reproducible, amplified bands with uniform brightness, dispersion phenomenon less.
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