人巨细胞病毒p52蛋白基因的克隆及表达

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目的制备人巨细胞病毒(HCMV)p52蛋白特异性抗原。②方法用PCR技术扩增HCMVp52蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA片段,克隆到表达载体pBV220中,转化E.coliDH5α株,用氨苄青霉素抗性和质粒酶切图谱分析法筛选阳性克隆,经温控诱导其表达。③结果重组克隆能有效表达天然蛋白p52,ELISA检测重组p52蛋白具良好的抗原特异性。④结论通过基因工程制备的重组p52蛋白可作为HCMV血清学诊断的良好抗原。 Objective To prepare human cytomegalovirus (HCMV) p52 protein specific antigen. Methods The DNA fragment coding for the IgM epitope of HCMVp52 protein was amplified by PCR and cloned into expression vector pBV220. The positive clones were screened by ampicillin resistance and plasmid restriction enzyme digestion, and their expression was induced by temperature control. Results The recombinant clones effectively expressed p52 protein, and the recombinant p52 protein detected by ELISA showed good antigen specificity. ④ Conclusion Recombinant p52 protein prepared by genetic engineering can be used as a good antigen for serological diagnosis of HCMV.
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