目的获得发形霞水母丝氨酸蛋白酶,为深入研究发形霞水母丝氨酸蛋白酶的功能奠定基础。方法综合运用生物信息学分析发形霞水母丝氨酸蛋白酶分子的序列特征和活性功能。通过设计带有特异性酶切位点的引物,将编码发形霞水母丝氨酸蛋白酶的核苷酸序列(CcSP1,CcSP2和CcSP3)从cDNA文库中扩增出来,利用pET-24a(+)载体构建重组表达质粒(pET24a-Cc SP1、pET24a-CcSP2和pET24a-CcSP3),经过筛选和鉴定正确后转入表达菌Rosetta(DE3).plysS。重组质粒转化表达菌在IPTG诱导下表达,利用SDS-PAGE电泳和Western-blot分析表达的重组蛋白。结果 SDS-PAGE电泳结果可见重组质粒转化的表达菌分别在34、42和30kDa处有蛋白条带,Western-blot检测显示,这些蛋白可特异性与抗His抗体反应,分别与预测重组蛋白分子量一致,鉴定为正确表达的目的重组蛋白。结论本研究成功构建了发形霞水母丝氨酸蛋白酶家族原核表达载体,获得了目标蛋白,为进一步研究水母丝氨酸蛋白酶的活性和功能奠定基础。