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【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】1550-1868（2014）12
【摘要】目的 探討莪术对人宫颈癌细胞的作用 方法 将40只裸鼠移植瘤模型随机分成两组，对照组给予生理盐水治疗，观察组给予莪术水煎液治疗。观察莪术对宫颈癌细胞的抑瘤率、生存时间及癌组织病理结果的变化。结果 莪术可抑制宫颈癌细胞的生长，抑瘤率达到32.76%，可以延长生存时间（P<0.05）。结论 莪术可以抑制肿瘤细胞生长，促进肿瘤细胞的凋亡，为临床的应用提供实验依据。
【关键词】莪术，宫颈癌细胞
宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤[1]，目前西医的治疗手段主要有手术、化疗及放疗等，不同患者，体质存在差异，有些不耐受手术、对放化疗不敏感，或无法承受放化疗的毒副作用，而放弃了治疗，使患者生活质量明显下降。
莪术为姜科植物蓬莪术、广西莪术及温郁金的干燥根茎，是常用中药之一，性：辛、苦、温归肝、脾经，具有破血行气、消积止痛的功效。主要治疗症瘕，积聚，宿食不消，妇女血瘀经闭，跌打损伤作痛等。近年来一些学者对莪术在临床上做了一些应用，结果研究表明莪术对治疗宫颈癌有一定的作用，但机制确不明确。本实验探讨一下莪术治疗宫颈癌是否可以延长生存时间及癌组织病理结果的变化，为临床的应用提供实验依据，奠定理论基础。
1.材料
1.1实验动物：
Balb/c-nu裸鼠40只、SPF级、 体重20-22g、 雌性，购于中国科学院上海实验动物中心。
1.2实验药品与试剂
RPMI-1640培养基、胎牛血清（FBS）、0.25%胰蛋白酶、DMSO均赛默飞世尔化学制品（北京）有限公司，PBS磷酸盐缓冲液、台盼蓝染液购于北京索莱宝科技有限公司。
莪术购买于山西省人民医院中药房。
1.3实验细胞
人宫颈癌Hela229细胞，购买于北京北纳创联生物技术研究院。
培养条件：RPMI-1640培养基90ml+FBS10ml+青霉素、链霉素各100u/ml。
2.实验方法
2.1裸鼠移植瘤模型的建立
此实验在山西医科大学动物实验中心SPF级实验室进行，严格无菌操作。
取对数生长期的宫颈癌Hela229细胞于每只裸鼠的背部皮下位置接种，数量约为1*106个。观察肿瘤的生长情况。
2.2分组给药情况
待移植瘤直径达到10mm时随机分成两大组，每组20只，之后再随机分成两小组，每组10只。对照组：给予生理盐水灌胃；实验组：莪术水煎液灌胃，每只5ml/kg，每天1次，共10天。
3.观察指标
3.1生存时间的观察：
对照组（n=10）和实验组（n=10）喂养动物直至死亡，计算荷瘤小鼠的平均生存时间。
3.2抑瘤率：
实验组（n=10）：在给药10天后的24小时采用颈椎脱臼法处死裸鼠，取出瘤体称重。对照组（n=10）：于实验组的同一时间取出瘤体称重后处死小鼠。按照以下公式计算抑瘤率：瘤重抑制率 （%） = （1- 实验组瘤重均值 / 对照组瘤重均值 ） ×100%。称重后固定组织进行常规病理检查。
4.统计方法
采用spss17.0软件分析数据，实验结果用均数±标准差（x±s）表示，用t检验分析。
结果
4.1抑瘤率：
实验组可明显抑制宫颈癌细胞肿瘤的生长，对照组的平均瘤重为（407.28±11.62 ）mg 实验组的平均瘤重为（273.82±7.62）mg，抑瘤率为32.76%，P<0.05差异有统计学意义
4.2生存时间：
对照组的平均生存时间为10.6±1.3，而实验组的平均生存时间为19.4±2.6 ，P<0.05差异有统计学意义。对照组的最长生存时间为21天； 实验组的最长存活时间为32天。
4.3病理特征：
对照组小鼠的肿瘤组织变化不明显，实验组肿瘤可见片状、点状的细胞坏死，坏死细胞结构不清楚，核深染，同时可见变小凋亡细胞、核固缩，呈不规则型。
5.讨论
目前研究表明莪术具有较好的抗肿瘤作用[2]，例如：杨丽华等用不同浓度的莪术油对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞进行干预，发现经不同浓度的莪术油处理后的MCF-7细胞，生长受到了明显的抑制，且细胞凋亡指数随药物浓度增加而明显增加[3]，除此之外，莪术对肺癌细胞、肝癌细胞、胃癌细胞等均有一定程度的抑制作用[4]。本实验用莪术水煎液治疗裸鼠移植瘤模型，结果发现未经莪术治疗的对照组的平均生存时间与经莪术治疗的实验组相比较明显缩短，实验组可明显抑制宫颈癌细胞肿瘤的生长，对照组的平均瘤重明显低于给药组，抑瘤率为32.76%。莪术治疗的裸鼠移植瘤细胞出现片状、点状的坏死，坏死细胞结构不清楚，核深染，同时可见变小凋亡细胞、核固缩，呈不规则型。这些结果表明莪术可以抑制癌细胞的生长，导致细胞坏死，并可延长生存时间，而具体的抑制癌细胞生长的机制尚不清楚，尚需要进一步研究。
参考文献
[1]乐杰.妇产科学[M].北京：人民卫生出版社，1980：267-268
[2]孔一凡，史克莉. 莪术研究概述[J]. 湖北中医药大学学报，2011，13（1） ： 47-49.
[3] 杨丽华， 姜 杰. 莪术油对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及Bal-2、Bax表达的影响[J]. 浙江中西医结合杂志，2010，20（12） ： 741-743.
[4] 方刚，肖夏清.莪术油抗肿瘤的临床应用及实验研究进展[J].广西中医学院学报， 2009，12（01） ： 61-63.
【摘要】目的 探討莪术对人宫颈癌细胞的作用 方法 将40只裸鼠移植瘤模型随机分成两组，对照组给予生理盐水治疗，观察组给予莪术水煎液治疗。观察莪术对宫颈癌细胞的抑瘤率、生存时间及癌组织病理结果的变化。结果 莪术可抑制宫颈癌细胞的生长，抑瘤率达到32.76%，可以延长生存时间（P<0.05）。结论 莪术可以抑制肿瘤细胞生长，促进肿瘤细胞的凋亡，为临床的应用提供实验依据。
【关键词】莪术，宫颈癌细胞
宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤[1]，目前西医的治疗手段主要有手术、化疗及放疗等，不同患者，体质存在差异，有些不耐受手术、对放化疗不敏感，或无法承受放化疗的毒副作用，而放弃了治疗，使患者生活质量明显下降。
莪术为姜科植物蓬莪术、广西莪术及温郁金的干燥根茎，是常用中药之一，性：辛、苦、温归肝、脾经，具有破血行气、消积止痛的功效。主要治疗症瘕，积聚，宿食不消，妇女血瘀经闭，跌打损伤作痛等。近年来一些学者对莪术在临床上做了一些应用，结果研究表明莪术对治疗宫颈癌有一定的作用，但机制确不明确。本实验探讨一下莪术治疗宫颈癌是否可以延长生存时间及癌组织病理结果的变化，为临床的应用提供实验依据，奠定理论基础。
1.材料
1.1实验动物：
Balb/c-nu裸鼠40只、SPF级、 体重20-22g、 雌性，购于中国科学院上海实验动物中心。
1.2实验药品与试剂
RPMI-1640培养基、胎牛血清（FBS）、0.25%胰蛋白酶、DMSO均赛默飞世尔化学制品（北京）有限公司，PBS磷酸盐缓冲液、台盼蓝染液购于北京索莱宝科技有限公司。
莪术购买于山西省人民医院中药房。
1.3实验细胞
人宫颈癌Hela229细胞，购买于北京北纳创联生物技术研究院。
培养条件：RPMI-1640培养基90ml+FBS10ml+青霉素、链霉素各100u/ml。
2.实验方法
2.1裸鼠移植瘤模型的建立
此实验在山西医科大学动物实验中心SPF级实验室进行，严格无菌操作。
取对数生长期的宫颈癌Hela229细胞于每只裸鼠的背部皮下位置接种，数量约为1*106个。观察肿瘤的生长情况。
2.2分组给药情况
待移植瘤直径达到10mm时随机分成两大组，每组20只，之后再随机分成两小组，每组10只。对照组：给予生理盐水灌胃；实验组：莪术水煎液灌胃，每只5ml/kg，每天1次，共10天。
3.观察指标
3.1生存时间的观察：
对照组（n=10）和实验组（n=10）喂养动物直至死亡，计算荷瘤小鼠的平均生存时间。
3.2抑瘤率：
实验组（n=10）：在给药10天后的24小时采用颈椎脱臼法处死裸鼠，取出瘤体称重。对照组（n=10）：于实验组的同一时间取出瘤体称重后处死小鼠。按照以下公式计算抑瘤率：瘤重抑制率 （%） = （1- 实验组瘤重均值 / 对照组瘤重均值 ） ×100%。称重后固定组织进行常规病理检查。
4.统计方法
采用spss17.0软件分析数据，实验结果用均数±标准差（x±s）表示，用t检验分析。
结果
4.1抑瘤率：
实验组可明显抑制宫颈癌细胞肿瘤的生长，对照组的平均瘤重为（407.28±11.62 ）mg 实验组的平均瘤重为（273.82±7.62）mg，抑瘤率为32.76%，P<0.05差异有统计学意义
4.2生存时间：
对照组的平均生存时间为10.6±1.3，而实验组的平均生存时间为19.4±2.6 ，P<0.05差异有统计学意义。对照组的最长生存时间为21天； 实验组的最长存活时间为32天。
4.3病理特征：
对照组小鼠的肿瘤组织变化不明显，实验组肿瘤可见片状、点状的细胞坏死，坏死细胞结构不清楚，核深染，同时可见变小凋亡细胞、核固缩，呈不规则型。
5.讨论
目前研究表明莪术具有较好的抗肿瘤作用[2]，例如：杨丽华等用不同浓度的莪术油对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞进行干预，发现经不同浓度的莪术油处理后的MCF-7细胞，生长受到了明显的抑制，且细胞凋亡指数随药物浓度增加而明显增加[3]，除此之外，莪术对肺癌细胞、肝癌细胞、胃癌细胞等均有一定程度的抑制作用[4]。本实验用莪术水煎液治疗裸鼠移植瘤模型，结果发现未经莪术治疗的对照组的平均生存时间与经莪术治疗的实验组相比较明显缩短，实验组可明显抑制宫颈癌细胞肿瘤的生长，对照组的平均瘤重明显低于给药组，抑瘤率为32.76%。莪术治疗的裸鼠移植瘤细胞出现片状、点状的坏死，坏死细胞结构不清楚，核深染，同时可见变小凋亡细胞、核固缩，呈不规则型。这些结果表明莪术可以抑制癌细胞的生长，导致细胞坏死，并可延长生存时间，而具体的抑制癌细胞生长的机制尚不清楚，尚需要进一步研究。
参考文献
[1]乐杰.妇产科学[M].北京：人民卫生出版社，1980：267-268
[2]孔一凡，史克莉. 莪术研究概述[J]. 湖北中医药大学学报，2011，13（1） ： 47-49.
[3] 杨丽华， 姜 杰. 莪术油对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及Bal-2、Bax表达的影响[J]. 浙江中西医结合杂志，2010，20（12） ： 741-743.
[4] 方刚，肖夏清.莪术油抗肿瘤的临床应用及实验研究进展[J].广西中医学院学报， 2009，12（01） ： 61-63.