论文部分内容阅读
目的:表达纯化胸腺嘧啶糖苷酶(TDG)蛋白并制备TDG多克隆抗体。方法:PCR扩增小鼠TDG(mTDG)的基因片段并插入pET28a(+)原核表达载体,表达并纯化His—mTDG融合蛋白。用纯化的His-mTDG蛋白免疫兔子产生抗血清,进一步亲和纯化抗血清制备抗TDG的多克隆抗体,并检测分析制备的抗体在Westernblotting和免疫荧光分析中的应用。结果:在低温(20℃)和低IPTG浓度(0.2mmol·L^-1)时,His-mTDG融合蛋白大部分在可溶上清部分,用亲和层析法分离纯化了Hi