【摘 要】
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获得了一个与甘蓝显性雄性不育基因连锁的延长随机引物扩增 DNA(Extended Random Primer Amplified DNA,ERPAD)标记EPT11900.EPT11900 是在与甘蓝显性雄性不育基因连锁的RAPD
【机 构】
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中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京 100081;
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获得了一个与甘蓝显性雄性不育基因连锁的延长随机引物扩增 DNA(Extended Random Primer Amplified DNA,ERPAD)标记EPT11900.EPT11900 是在与甘蓝显性雄性不育基因连锁的RAPD标记OT11900的基础上,通过逐步筛选3端延长的随机引物的方法转化而成的稳定性和特异性都得到增强的新标记. 这种标记的稳定性和特异性接近SCAR标记,但不需要克隆和测序.该方法首先根据OPT11的序列合成 3端添加A、T、C、G 4种碱基的4个引物,组成10个引物对.以不育池为模板筛选出OT11-C+OT11-G为唯一能够扩增长度与OT11900相同的一个片段的引物对.在此引物对基础上,又添加4种碱基得到8个新的引物,相互组合成16个引物对.进一步以不育池为模板筛选出OT11-CT+OT11-GA,在严格条件下,它可特异扩增长度与OT11900相同的一个片段EPT11900.通过分离群体分析证实这一片段与OT1 1900处于同一位点.
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