人胸苷激酶基因cDNA克隆

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目的克隆人胸苷激酶基因cDNA.方法采用逆转录PCR方法扩增胸苷激酶cDNA,用十二烷基氟波酯(TPA)刺激人外周血细胞的mRNA为模板;扩增的PCR产物经TA克隆重组和内切酶鉴定,以及DNA序列分析确定克隆基因的序列.结果经逆转录PCR扩增出一个700bp左右的DNA片段,TA克隆出现16个阳性克隆,选择其中的一个克隆(TKTA8)进行DNA序列分析,序列分析结果表明TKTA8克隆重组的序列是人胸苷激酶的cDNA序列.结论从外周血细胞中得到了hTK完整的开放读码框架.
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