反义乙型肝炎病毒S基因T载体克隆的构建

来源 :郑州大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:feihuiy1
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目的:构建含部分乙型肝炎病毒(HBV)S基因反义序列的基因克隆。方法:根据GenBank中HBVS基因序列和计算机软件mCLONE分析的结果,设计S基因2侧引物,直接扩增出适合长度的反义HBVS基因,与PMD18T载体连接后转化DH5α,筛选阳性克隆,抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定,再行序列分析。结果:获得226bp含限制性内切酶位点的阳性产物,T载体克隆经PCR及酶切鉴定和序列分析后证实,克隆片段的反向序列与GenBank中该基因的序列同源性为97%。结论:成功构建了含反义HBVS基因部分序列的T载
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