DJ-1通过促进EMT进程增强辐照诱导下食管鳞癌细胞的侵袭性

来源 :南京医科大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:woNO111
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目的:探究敲低DJ-1/PARK7表达及联合辐照对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响及分子机制.方法:利用短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)稳定转染食管鳞癌细胞kyse 150和kyse450,敲低DJ-1表达.Western blot检测细胞转染效率.Transwell迁移实验检测梯度辐照(0、4、6、8Gy)下食管鳞癌细胞的迁移能力.将转染空病毒的对照组(shRNA-Control)与DJ-1敲低组(shRNA-DJ-1)细胞进行6 Gy X线辐照,细胞划痕实验及Transwell迁移侵袭实验检测各组食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力.Western blot检测上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)途径相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)的表达变化.结果:敲低DJ-1后,食管鳞癌细胞kyse150和kyse450内DJ-1蛋白表达水平明显降低.Transwell迁移实验显示,6Gy剂量辐照诱导食管鳞癌细胞kyse150和kyse450的迁移能力最强.细胞划痕实验及Transwell迁移侵袭实验显示,在6Gy辐照条件下敲低DJ-1后kyse150和kyse450细胞迁移和侵袭能力减弱.Western blot显示,敲低DJ-1联合辐照后E-cadherin表达上升,N-cadherin表达下降,MMP2表达下降.结论:敲低DJ-1表达可以降低辐照诱导的食管鳞癌细胞kyse150和kyse450的迁移和侵袭能力,其机制可能与通过上调E-cadherin、下调N-cadherin和MMP2蛋白表达从而抑制细胞EMT进程有关.
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