【摘 要】
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目的:探究miR-650是否通过介导LATS1表达参与TNF-α 对结肠癌细胞增殖和凋亡的调控.方法:双荧光素酶报告基因分析法验证miR-650对LATS1的靶向作用.用不同浓度TNF-α处理SW480
【机 构】
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贵州中医药大学第一附属医院肛肠科,贵阳,550000
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目的:探究miR-650是否通过介导LATS1表达参与TNF-α 对结肠癌细胞增殖和凋亡的调控.方法:双荧光素酶报告基因分析法验证miR-650对LATS1的靶向作用.用不同浓度TNF-α处理SW480细胞,分别构建miR-650抑制表达、LATS1过表达和经TNF-α处理的miR-650过表达SW480细胞株,qRT-PCR检测miR-650表达水平,Western blot检测LATS1、CyclinD1、Bcl-2、p21和Bax蛋白表达水平,MTT实验检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:LATS1是miR-650的靶基因,miR-650可负性调控LATS1的表达.TNF-α处理可抑制SW480细胞的增殖,促进细胞凋亡,并可抑制miR-650、CyclinD1和Bcl-2的表达,促进LATS1、Bcl-2和p21的表达.抑制miR-650表达或LATS1过表达均可抑制SW480细胞的增殖,促进细胞凋亡.miR-650过表达可部分逆转TNF-α对SW480细胞的增殖抑制和凋亡促进作用.结论:TNF-α通过下调miR-650/LATS1抑制结肠癌细胞的增殖,促进细胞凋亡.
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