【摘 要】
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目的应用结核分枝杆菌特异的rDNA探针杂交检测痰标本中的结核杆菌rDNA,评价其在临床标本检测中的应用价值.方法用引物b对结核分枝杆菌16S-23S rDNA间隔区序列进行扩增,同时加
【机 构】
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解放军309医院结核病研究室,北京,100091
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目的应用结核分枝杆菌特异的rDNA探针杂交检测痰标本中的结核杆菌rDNA,评价其在临床标本检测中的应用价值.方法用引物b对结核分枝杆菌16S-23S rDNA间隔区序列进行扩增,同时加入生物素标记,制成250bp的rDNA探针.对该探针的敏感性、特异性进行了研究,并对90份结核病人,30份非结核病人痰标本的PCR产物进行了斑点杂交检测.结果 rDNA探针检测引物b PCR扩增产物的敏感性为100pg.rDNA探针与受试24种分枝杆菌和11种非分枝杆菌引物b PCR扩增产物杂交只有结核分枝杆菌、胃分枝杆菌为阳性杂交,特异性较高.而rDNA探针对90份结核病人痰标本引物b扩增产物检测的阳性率为80.2%,高于PCR扩增产物电泳检测结果(64%).rDNA探针与30份非结核病人痰标本杂交结果均为阴性杂交.结论 rDNA探针与引物b PCR扩增相结合能提高结核病人痰标本检测的敏感性与特异性.
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