【摘 要】
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目的构建卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体。方法体外培养卡介苗菌株并提取基因组DNA,扩增Hsp16.3基因两侧序列5＇-Hsp16.3和3＇-Hsp16.3,分别插入到pKO质粒载体预定位点中构建Hsp1
【机 构】
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石河子大学医学院病理生理学教研室（石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室）
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目的构建卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体。方法体外培养卡介苗菌株并提取基因组DNA,扩增Hsp16.3基因两侧序列5＇-Hsp16.3和3＇-Hsp16.3,分别插入到pKO质粒载体预定位点中构建Hsp16.3基因置换型打靶载体,筛选并进行PCR、双酶切鉴定及测序鉴定。结果构建的卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体,经PCR、双酶切鉴定及测序证实pKO质粒中的2个插入片段为所需目的基因。结论成功构建出卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体。
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