【摘 要】
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目的构建人活性转录因子4(ATF4)慢病毒,探讨C2C12细胞成骨分化过程中ATF4基因慢病毒修饰对其增殖和凋亡的影响。方法构建ATF4重组慢病毒载体质粒,然后与2个包装质粒共转入293
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室发育生物学与模式动物平台
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目的构建人活性转录因子4(ATF4)慢病毒,探讨C2C12细胞成骨分化过程中ATF4基因慢病毒修饰对其增殖和凋亡的影响。方法构建ATF4重组慢病毒载体质粒,然后与2个包装质粒共转入293T细胞中包装成ATF4慢病毒(LV-ATF4);用病毒感染C2C12细胞,并用流式细胞仪(FCM)检测BMP2诱导C2C12细胞分化时对其增殖凋亡的影响,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达,电子显微镜观察凋亡细胞的形态学结构变化。结果成功构建和包装了ATF4重组慢病毒。FCM检测结果表明,BMP2+LV-ATF4处理组S期细胞(14.89%)低于BMP2+LV-GFP组(30.64%)(P<0.05);BMP2+LV-ATF4处理组细胞凋亡率(31.06%)高于BMP2+LV-GFP组(11.39%)(P<0.05);凋亡相关蛋白的表达与FCM结果一致。结论在BMP2诱导C2C12细胞成骨分化时,LV-ATF4慢病毒可促进C2C12细胞的凋亡,抑制其增殖。
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