【摘 要】
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目的研究人去势抵抗前列腺癌(CRPC)中YES相关蛋白1(YAP1)与前列腺特异性抗原(PSA)的关系,探究YAP1对PSA的调控机制。方法用荧光素酶报告基因检测LNCaP和C4-2细胞过表达YAP1后PSA基因启动子区活性变化;用免疫蛋白印迹实验检测过表达YAP1基因对不同前列腺癌细胞系内PSA蛋白的影响,并观察沉默YAP1对C4-2细胞内PSA蛋白的影响;使用Q-PCR进一步验证在C4-2细胞
【机 构】
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天津医科大学第二医院泌尿外科 天津市泌尿外科研究所,天津 300211,天津医科大学第二医院泌尿外科 天津市泌尿外科研究所,天津 300211,天津医科大学第二医院泌尿外科 天津市泌尿外科研究所,天津
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目的研究人去势抵抗前列腺癌(CRPC)中YES相关蛋白1(YAP1)与前列腺特异性抗原(PSA)的关系,探究YAP1对PSA的调控机制。
方法用荧光素酶报告基因检测LNCaP和C4-2细胞过表达YAP1后PSA基因启动子区活性变化;用免疫蛋白印迹实验检测过表达YAP1基因对不同前列腺癌细胞系内PSA蛋白的影响,并观察沉默YAP1对C4-2细胞内PSA蛋白的影响;使用Q-PCR进一步验证在C4-2细胞内过表达YAP1基因对其PSA mRNA表达量的改变;使用免疫蛋白印迹实验探究YAP1对C4-2细胞内雄激素受体(AR)的作用。
结果发现在CRPC中过表达YAP1后,luciferase实验发现C4-2细胞实验组和对照组比值平均值为3.17815892>2,P<0.001,Q-PCR检测所有过表达YAP1各基因片段后,发现实验组PSA mRNA测定值为2.306667,1.553333333,2.613333333,2.673333333均高于对照组1,且P<0.001,提示PSA表达量显著增高;western blot实验发现C4-2细胞过表达Yap1后,AR条带相比于对照组明显增强,提示YAP1过表达组细胞核内AR蛋白表达水平明显增高。
结论YAP1可能在CRPC中正向调控PSA的表达,且有促进AR入核发挥作用的能力。
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