【摘 要】
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目的 研究类表皮生长因子域7( Egfl7)在动脉粥样硬化斑块内的表达水平和小分子干扰RNA(siRNA)对内皮细胞株血管生长因子表达的影响. 方法 利用免疫组化和免疫荧光染色检测
【机 构】
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山东大学第二医院心内科,山东大学医学院生化与分子生物学研究所,山东大学齐鲁医院心内科
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目的 研究类表皮生长因子域7( Egfl7)在动脉粥样硬化斑块内的表达水平和小分子干扰RNA(siRNA)对内皮细胞株血管生长因子表达的影响. 方法 利用免疫组化和免疫荧光染色检测人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7的表达水平；并利用以Egfl7为靶标的siRNA,通过脂质体将siRNA转入人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照,在干扰后0h,12 h,24 h,48 h,反转录聚合酶链反应(PT-PCR)检测Egfl7、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子A、B(PDGF-A、PDGF-B) mRNA水平的改变,免疫印迹法检测Egfl7、VEGF、PDGF、血管细胞黏附分子(VCAM)及细胞间黏附分子(ICAM)蛋白表达水平的变化.结果 人髂动脉和小鼠无名动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平上调；HUVEC内Egfl7在siRNA干扰后0h、12 h、24 h、48 h时mRNA表达分别为(0.31±0.05)、(0.14±0.02)、(0.09±0.01)、(0.02±0.01),蛋白表达为(0.93±0.08)、(0.71±0.11)、(0.39±0.09)、(0.07±0.01).Egfl7、VEGF、PDGF-A、PDGF-B mRNA及其蛋白表达水平随干扰时间延长均下降或抑制,与siRNA干扰0h比较差异有统计学意义(均P＜0.05). 结论 动脉粥样硬化斑块内Egfl7表达水平提高；siRNA抑制HUVEC Egfl7表达水平的同时,其他血管生长因子和黏附分子表达水平亦下降.
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