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根据ＧｅｎＢａｎｋ中Ｗｅｓｅｌｉｎｇ发表的犬冠状病毒Ｋ３７８株纤突蛋白基因序列，设计合成了能扩增３７２ｂｐ基因片段的套式引物。用异硫氰酸胍－酚－仿一步抽取法提取细胞总ＲＮＡ进行反转录，再以此产物进行套式ＰＣＲ扩增，并筛选出最佳套式ＰＣＲ扩增条件。结果经套式ＰＣＲ扩增能得到与设计大小相同的产物，并且不扩增犬细小病毒，犬瘟热病毒，犬Ｉ型腺病毒，狂犬病病毒的核酸。敏感性试验表明，此法能扩增出犬冠状病毒强