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目的 构建小鼠粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子(mGM—CSF)工程菌,通过摸索其变、复性和纯化条件,得到高纯度高比活的重组mGM—CSF蛋白。方法 以本实验室构建的hIL-2/mGM-CSF融合蛋白表达载体为模板,PCR扩增mGM-CSF基因,克隆人pET—11c表达载体。转化BL21,构建BL21/pET-11c/mGM—CSF工程菌,用本所专利方法提取包涵体,在含低浓度盐酸胍的复性液中复性,采用镍离子亲和层析纯化。结果 工程菌采用TH肉汤培养,32℃、0.1mmol/L IPTG双重诱导,表达量达菌体蛋