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目的:
探讨外源性基因转移至小血管吻合口的可行性。
方法:用浸泡过质粒蔗糖PBS溶液的医用尼龙缝线进行大鼠颈总动脉端端吻合,对照组应用浸泡过PN2质粒溶液的缝线,治疗组应用浸泡过PN2-Lacz质粒溶液的缝线进行血管吻合。分批取出血管吻合口,进行组织DNA的Southern印迹杂交,β-半乳糖苷酶活性检测和组织化学染色。
结果:治疗组术后2天、7天、90天提取的DNA,与Lacz探针杂交,则见有明显的杂交带,而对照组则无此杂交带。对照组术后未检测到β-半乳糖苷酶活性,治疗组术后2天即可检测到、7天活性最高、90天仍测得活性。治疗组术后2天、7天、90天分别有100%、100%、80%的吻合口β-半乳糖苷酶组织化学染色有蓝染,而对照组则无蓝染。
结论:缝线法为新的一种在体小血管吻合口直接转基因方法,它可使外源基因转移至吻合口中并稳定地表达出具有生物活性的基因产物。