影响HIV-1整合酶活性因素的探讨

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:FlyingBird173
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目的探讨HIV-1整合酶活性的影响因素,优化其活性测定条件。方法以同位素标记的寡核苷酸链为底物,体外模拟HIV-1病毒DNA整合过程,检测HIV-1整合rn酶的3'端加工、链转移和去整合活性,并考察HIV-1整合酶活性测定中,二价离子、酸碱度、温度和时间等的影响。结果 Mn2+对整合酶活性的辅助作用,明显强于Mg2+,而3'端加工反应对二价离子的依赖性较小。酸碱度对各种反应的影响较大,温度和时间影响较小。结论整合酶活性检测的最佳反应条件为pH7.0~7.5,37℃,15mmol/L Mn2+及反应时间1 h。
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