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建立用外标法测定盐酸美他环素片含量的简单高效液相色谱方法。采用PumspherStar C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为:V(甲醇):V(水):50:50混合后用H3PO4调节pH至3.0±0.02;检测波长:280nm;进样量:20μL,流量:0.7mL/min;温度35℃。美他环素在20.02~200.2μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.99999);平均回收率为98.6%,回收率的RSD为0.6%。本方法可用于盐酸美他环素片的含量测定。