葡萄果实cDNA文库的构建及鉴定

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构建葡萄果实cDNA文库是研究果实发育相关基因表达调控的基础工作。本实验从巨峰葡萄果实中提取了高质量的RNA,利用MMLV反转录酶把总RNA中的mRNA反转录成cDNA第一链,用特异引物进行LD-PCR扩增合成双链eDNA。将分级纯化的带有粘性末端双链cDNA与λTrip Ⅰ Ex2载体连接,重组载体体外包埋成为cDNA原始文库。初步鉴定原始文库的滴度为1.32×10^6pfu/mL,文库扩增后滴度达1.45×10^10pfu/mL。从扩增文库中随机挑取250个克隆进行PCR鉴定,结果
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