【摘 要】
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目的:观察柴胡疏肝散对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃动力、胃组织线粒体功能及线粒体自噬的影响,揭示柴胡疏肝散防治FD的作用机制.方法:将32只SPF级SD大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组、模型组、柴胡疏肝散组(4.8 g·kg-1),多潘立酮组(4.5 mg·kg-1),每组8只.除正常组外,其余3组均采用改良夹尾刺激法复制FD大鼠模型.4周后,采用营养性半固体糊法观察FD大鼠胃排空率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清柠檬酸合成酶(CS),胃动素(MTL),胃泌素(GAS)含量,苏木素-伊红(
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院,上海200021
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目的:观察柴胡疏肝散对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃动力、胃组织线粒体功能及线粒体自噬的影响,揭示柴胡疏肝散防治FD的作用机制.方法:将32只SPF级SD大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组、模型组、柴胡疏肝散组(4.8 g·kg-1),多潘立酮组(4.5 mg·kg-1),每组8只.除正常组外,其余3组均采用改良夹尾刺激法复制FD大鼠模型.4周后,采用营养性半固体糊法观察FD大鼠胃排空率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清柠檬酸合成酶(CS),胃动素(MTL),胃泌素(GAS)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察胃组织病理变化,透射电镜观察线粒体特征,免疫荧光共定位法观察胃组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)与电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)表达,提取新鲜胃组织线粒体,生化试剂盒检测线粒体活性氧(ROS),丙二醛(MDA)水平,超氧化物歧化酶(SOD)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体LC3,自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1),p62蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠胃排空率显著降低(P＜0.01),血清CS,MTL,GAS含量显著降低(P＜0.01),HE染色可见各组大鼠胃组织未见糜烂、溃疡等病理改变,透射电镜观察胃组织线粒体肿胀、扩张,出现空泡病变,LC3和VDAC1免疫荧光共定位表达显著增加(P＜0.01),线粒体ROS,MDA含量显著升高(P＜0.01),SOD含量显著降低(P＜0.01),LC3,Beclin1蛋白表达水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),p62蛋白表达水平明显下降(P＜0.05);与模型组比较,柴胡疏肝散组和多潘立酮组大鼠胃排空率均明显升高(P＜0.05),血清CS,MTL,GAS含量明显升高(P＜0.05,P＜0.01),透射电镜观察胃组织线粒体核膜完整,内部嵴形态清晰,嵴密度较高,部分存在线粒体分裂融合现象,LC3和VDAC1共定位表达显著减少(P＜0.01),线粒体ROS,MDA含量均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),SOD含量明显升高(P＜0.05),LC3,Beclin1蛋白表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),p62蛋白表达水平显著升高(P＜0.01).结论:柴胡疏肝散防治FD的作用机制可能与改善胃组织线粒体功能、抑制线粒体自噬有关.
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