【摘 要】
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目的 探究miR-31a-5p在心肌梗死（myocardial infarction,MI）小鼠中的表达及其潜在的作用机制。方法 从基因表达数据库中下载数据集，并使用生物信息学方法筛选出miR-31a-5p及其预测靶基因缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）。通过结扎C57BL/6J雄性小鼠冠状动脉左前降支建立MI模型。小鼠随机分为假手术组、模型
【基金项目】
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国家自然科学基金（81873461）；
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目的 探究miR-31a-5p在心肌梗死（myocardial infarction,MI）小鼠中的表达及其潜在的作用机制。方法 从基因表达数据库中下载数据集，并使用生物信息学方法筛选出miR-31a-5p及其预测靶基因缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）。通过结扎C57BL/6J雄性小鼠冠状动脉左前降支建立MI模型。小鼠随机分为假手术组、模型组。采用氯化钴（CoCl2）处理H9c2细胞诱导体外缺氧细胞模型，分为对照组、模型组、NC组、miR-31a-5p mimic组、miR-31a-5p inhibitor组；通过Masson染色并分析心肌组织纤维化程度；通过qRT-PCR检测小鼠心肌组织、H9c2细胞中miR-31a-5p和HIF-1αmRNA的表达水平；使用Western blot分别检测小鼠心肌组织凋亡蛋白：B细胞淋巴瘤2（B-cell lymphoma 2,Bcl-2）、半胱氨酸蛋白酶-3剪切体（cleaved-caspase3）以及H9c2细胞中HIF-1α和凋亡蛋白的表达水平。采用双荧光素酶报告基因测定验证miR-31a-5p与HIF-1α的靶向关系。结果 Masson染色结果表明MI小鼠纤维化程度显著升高（P＜0.000 1）；在MI小鼠和CoCl2处理的H9c2细胞中miR-31a-5p显著升高，cleaved-caspase 3升高，Bcl-2下降（P均＜0.05）。双荧光素酶基因测定结果表明miR-31a-5p mimic与HIF-1α-3’-UTR WT质粒共转染的相对荧光素酶活性降低（P＜0.000 1）;miR-31a-5p mimic可降低CoCl2诱导的H9c2细胞中HIF-1α的表达，并增加细胞凋亡蛋白水平（P均＜0.05），而miR-31a-5p起到相反的作用。结论 miR-31a-5p可通过靶向HIF-1α促细胞凋亡加重心肌缺血损伤。
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