甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体的构建

来源 :果树学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yangglan2

【摘要】

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应用RNA反义技术抑制甜瓜果实发育过程中酸性转化酶活性，促进蔗糖积累，从而为培育优质品种提供了可行的新方法。将已克隆到pMD18-T载体上的甜瓜酸性转化酶基因用BamHⅠ和HincⅡ

【作者】

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于喜艳田红梅樊继德王秀峰

【机构】

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山东农业大学园艺科学与工程学院

【出处】

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果树学报

【发表日期】

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2006年6期

【关键词】

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甜瓜酸性转化酶基因反义载体烟草转化 Melon Acid invertase gene Antisense expression vector T

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（项目编号30471191）,山东农业大学博士基金项目.

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应用RNA反义技术抑制甜瓜果实发育过程中酸性转化酶活性，促进蔗糖积累，从而为培育优质品种提供了可行的新方法。将已克隆到pMD18-T载体上的甜瓜酸性转化酶基因用BamHⅠ和HincⅡ双酶切，得到该基因编码区1038bp的cDNA片段，将其定向插入到植物表达载体pROK2的BamHⅠ／SmaⅠ克隆位点，构建了甜瓜酸性转化酶cDNA反义表达载体（Anti-MAI1）。采用冻融法将其转入根癌农杆菌LBA4404，得到了完整的Ti质粒表达载体系统。利用叶盘法转化烟草，经PCR和PCR-Southern杂交检测，证

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