【摘 要】
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筛选具有活性人源化甲状腺球蛋白单链抗体,并探索FR区基因突变对人源化甲状腺球蛋白单链抗体抗原结合力的影响。利用噬菌体展示技术克隆Tg人源化抗体基因,获得FR区基因突变的
【机 构】
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上海中医药大学附属普陀医院检验科,
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筛选具有活性人源化甲状腺球蛋白单链抗体,并探索FR区基因突变对人源化甲状腺球蛋白单链抗体抗原结合力的影响。利用噬菌体展示技术克隆Tg人源化抗体基因,获得FR区基因突变的克隆,鉴定并分析其对单链抗体抗原结合力的影响。通过基因序列分析,突变类型共有3种:FR-3区Met91→Ile91、FR-4区Gln117→His117及两种突变同时存在。抗原结合力实验显示,突变单链抗体与抗原的结合活性显著降低。软件分析显示:突变造成了抗体的CDR区及FR区空间结构的细微变化,抗体疏水性、亲水性及电势也明显发生改变。获得了具有活性的人源化甲状腺球蛋白单链抗体,FR区的突变对人源化甲状腺球蛋白单链抗体的抗原结合力影响显著。
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