【摘 要】
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[目的]探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)缓解染硅尘小鼠肺泡炎的机制.[方法]取无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠10只,选择5只小鼠以全骨髓贴壁法分离培养BMSC,另外5只小鼠用于诱
【机 构】
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广东省职业病防治院,广东省职业病防治重点实验室,广东广州510300;峨眉山市疾病预防控制中心,四川峨眉山614299
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[目的]探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)缓解染硅尘小鼠肺泡炎的机制.[方法]取无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠10只,选择5只小鼠以全骨髓贴壁法分离培养BMSC,另外5只小鼠用于诱导骨髓巨噬细胞(BMDM).取同类小鼠随机分为对照组、二氧化硅(SiO2)组以及SiO2染毒后BMSC移植组,每组10只.采用气管暴露法,将对照组小鼠经气管软骨间隙给予一次性注射0.90％氯化钠溶液20.0 μL;SiO2组和BMSC移植组小鼠先予一次性注射质量浓度为250 g/L的SiO2混悬液20.0 μL,6h后经鼠尾静脉分别一次性输注500.0 μL的0.90％氯化钠溶液或BMSC(细胞密度为1×109/L).造模后第3d处死小鼠,免疫印迹检测小鼠肺组织中嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3 (NALP3)等炎性小体组分含量.Transwell体外共培养体系,上室接种小鼠BMDM,下室接种BMSC,使用SiO2刺激BMDM,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测BMDM培养上清中白细胞介素(IL)-1β的表达情况,免疫印迹检测BMDM中NALP3炎性小体组分含量.[结果]与SiO2组小鼠比较,BMSC移植组小鼠肺组织中白介素-1β前体(pro-IL-1β)、白介素-1β (IL-1β)、天冬氨酸蛋白水解酶-1前体(pro-caspase-1)、天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)表达水平下调(P＜0.01).BMSC共培养组BMDM培养上清中IL-1β浓度均低于对照组(P＜0.05),BMDM中pro-IL-1β、IL-1β、pro-caspase-1、caspase-1表达水平均低于SiO2组(P＜0.01),直接加入不合细胞的BMSC培养上清(SN),则上述指标无明显变化.[结论]BMSC可能抑制SiO2染尘小鼠的BMDM的NALP3炎性小体通路.
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