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目的：建立体外联合肝细胞生长因子（HGF）和表皮生长因子（EGF）培养人胆囊上皮细胞（HGBECs）方法。方法先剥离上皮，采用反复Ⅳ型胶原酶消化配合刮取HGBECs，制备成单细胞悬液进行接种，细胞分别接种于含或不含10ng/mLEGF以及含10ng/mLHGF＋10ng/mLEGF的培养基进行原代培养。倒置显微镜下观察细胞生长的形态变化，细胞计数、噻唑蓝（MTT）法检测HGF＋EGF对HGBECs增殖的影响。结果成功培养HGBECs。添加HGF＋EGF组较添加EGF组HG-BECs增殖速度快且维持时间长；