【摘 要】
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目的 探讨泮托拉唑对急性肺损伤(ALI)模型大鼠和人肺微血管内皮细胞(HPMECs)损伤的作用及作用机制.方法 将48只SD大鼠随机分为正常对照组,脂多糖组,阳性对照组,泮托拉唑低、高剂量组和泮托拉唑高剂量+氯喹组,各8只.除正常对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射5 mg/kg脂多糖复制ALI模型;阳性对照组大鼠腹腔注射2 mg/kg地塞米松,泮托拉唑低、高剂量组分别腹腔注射泮托拉唑26,104 mg/kg,泮托拉唑高剂量+氯喹组注射104 mg/kg泮托拉唑和10 mg/kg氯喹,正常对照组和脂多糖组大鼠
【机 构】
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海南西部中心医院药剂科,海南 儋州 571799
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目的 探讨泮托拉唑对急性肺损伤(ALI)模型大鼠和人肺微血管内皮细胞(HPMECs)损伤的作用及作用机制.方法 将48只SD大鼠随机分为正常对照组,脂多糖组,阳性对照组,泮托拉唑低、高剂量组和泮托拉唑高剂量+氯喹组,各8只.除正常对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射5 mg/kg脂多糖复制ALI模型;阳性对照组大鼠腹腔注射2 mg/kg地塞米松,泮托拉唑低、高剂量组分别腹腔注射泮托拉唑26,104 mg/kg,泮托拉唑高剂量+氯喹组注射104 mg/kg泮托拉唑和10 mg/kg氯喹,正常对照组和脂多糖组大鼠均腹腔注射等体积生理盐水.取对数生长期的HPMECs,随机分为正常对照组,脂多糖组,阳性对照组,泮托拉唑低、高剂量组和泮托拉唑高剂量+氯喹组.除正常对照组(给予等体积生理盐水)外,其余各组细胞添加100μg/mL脂多糖,以构建HPMECs损伤模型,阳性对照组添加100 nmol/L地塞米松,泮托拉唑低、高剂量组细胞分别添加泮托拉唑40,80μg/mL,泮托拉唑高剂量+氯喹组添加80μg/mL泮托拉唑和5μmol/L氯喹.采用苏木精-伊红染色法检测大鼠肺组织的病理学变化,测定肺组织湿/干重比值(W/D);采用TUNEL染色法检测大鼠肺组织细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附法检测肺组织和HPMECs细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)水平;采用CCK-8法检测细胞活性;采用蛋白免疫印迹法检测肺组织和HPMECs细胞中LC3、Beclin1、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)的表达水平.结果 与脂多糖组比较,阳性对照组,泮托拉唑低、高剂量组大鼠肺组织病理学评分、W/D值均显著降低(P<0.05),大鼠血清和HPMECs细胞中TNF-α,IL-6,IL-1β水平均显著降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞数均显著减少(P<0.05),细胞凋亡率和p-mTOR/mTOR表达水平均显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1表达水平均显著升高(P<0.05).结论 泮托拉唑可通过mTOR信号通路调控自噬,在ALI模型大鼠和HPMECs损伤中发挥保护作用.
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