真菌免疫调节蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗体制备

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目的 通过在大肠杆菌中表达真菌免疫调节蛋白LZ-8,以制备高效价的抗体。方法 将所克隆的LZ-8基因构建成原核表达载体pET-30a—lz8,转化人大肠杆菌BL21感受态细胞中,经IPTG诱导其表达;原核表达产物经金属镍离子螯合柱纯化后,采用常规方法制备家兔多克隆抗体,并用间接ELISA法测定阳性血清的效价。结果 大肠杆菌表达产物经SDS—PAGE电泳检测到相对分子量约为14ku的目的蛋白;用考马斯亮兰法测定所表达的外源蛋白表达量为34.46mg/L;纯化后的目的蛋白免疫家兔后。经间接ELISA检测阳性血
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