【摘 要】
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目的 构建串联低氧反应元件（HRE）报告质粒pGL3-EPO-HRE并进行功能验证。方法 按照人促红细胞生成素（EPO）基因3′末端HRE增强子序列，人工设计合成首尾2段3′末端部分互补的单链DNA，
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学微循环研究所
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目的 构建串联低氧反应元件（HRE）报告质粒pGL3-EPO-HRE并进行功能验证。方法 按照人促红细胞生成素（EPO）基因3′末端HRE增强子序列，人工设计合成首尾2段3′末端部分互补的单链DNA，然后通过退火及延伸合成两端带有Mlu Ⅰ和Bgl Ⅱ酶切位点的包含3个串联排布的HRE的双链DNA，克隆到T载体测序正确后，将其插入到pGL3-promoter报告载体。构建好的pGL3-EPO-HRE分别与pcDNA3-HIF-1α和pcDNA3共转染MCF-7细胞，经氯化钴（CoCl2）作用24h后测定报
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