【摘 要】
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目的探讨临床标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药机制。方法收集2010年1月—2013年12月临床标本中分离的CRKP。采用Vitek-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院检验科临床微生物室
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目的探讨临床标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药机制。方法收集2010年1月—2013年12月临床标本中分离的CRKP。采用Vitek-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定并联合纸片扩散法（K-B法）进行药物敏感性试验,MicroflexTMMALDI-TOF MS进行菌种复核。改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶表型;PCR方法检测blaKPC、blaGES、blaIMP、blaVIM、blaNDM-1和blaOXA-48等碳青霉烯酶基因及AmpC酶基因,并对阳性扩增产物进行基因测序;SDS-PAGE检测菌株外膜蛋白Ompk35和Ompk36的表达情况;对携带碳青霉烯酶基因的菌株进行质粒转移接合试验。结果 75株CRKP中,有71株改良Hodge试验阳性,其中69株携带blaKPC-2基因合并Ompk36变异（68株）或Ompk36缺失（1株）;1株携带blaIMP-4基因合并Ompk35和Ompk36变异,1株携带blaNDM-1和blaCIT-1基因合并Ompk35和Ompk36变异。4株改良Hodge试验阴性的菌株中,3株DHA4基因阳性合并Ompk36缺失（1株）或Ompk36变异（2株）,另1株未检测到耐药基因但Ompk36缺失。仅4株产碳青霉烯酶菌株（4/71）转移接合试验成功。结论临床标本分离的CRKP对碳青霉烯类抗生素的主要耐药机制为产KPC-2酶合并外膜蛋白表达异常。需加强院内感染预防控制措施,防止此类菌株的播散。
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