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目的 探讨后纵韧带骨化(OPLL)特异性微小RNA-563(miR-563)在OPLL患者后纵韧带细胞成骨分化中的作用及机制.方法 选择2015年3月至6月在第二军医大学长征医院脊柱外科接受手术治疗的6例OPLL患者,于颈椎前路减压手术中取OPLL患者未骨化的后纵韧带部分(OPLL组),选择同期在同一单位接受手术治疗的4例颈椎外伤患者,以同样方法于术中取其后纵韧带(PLL组),采用贴壁法对获取的后纵韧带进行体外培养,利用real-time PCR检测两组间miR-563的表达差异.对OPLL组后纵韧带细胞转染RNA oligo过表达和抑制miR-563后进行成骨诱导,通过检测茜素红染色水平、碱性磷酸酶水平及成骨相关基因的表达验证miR-563在OPLL组后纵韧带细胞成骨分化中的作用.预测miR-563靶基因,并利用双荧光素酶报告基因实验验证其靶向作用.应用t检验对组间的数据进行比较.结果 OPLL组miR-563的表达水平高于PLL组(8.53±0.84比1.00±0.12,t=21.629,P=0.000).韧带细胞过表达miR-563后茜素红染色水平(2.52±0.25比1.00±0.14)、碱性磷酸酶水平(3.11±0.55比1.00±0.11)及成骨相关基因表达(RUNX2:3.25±0.55比1.00±0.10;IBSP:2.35±0.32比1.00±0.14)均高于对照组(t值为7.43～10.99,P值均=0.000).而抑制miR-563后则上述指标较对照组出现明显下调(茜素红染色:0.52±0.21比1.00±0.12;碱性磷酸酶:0.41±0.12比1.00±0.09;RUNX2:0.35±0.13比1.00±0.12;IBSP:0.55±0.12比1.00±0.11;t值为-8.45～-4.36,P值均＜0.05).通过Targetscan预测miR-563的靶基因为SMURF1,通过过表达miR-563检测SMURF1表达水平发生明显下调(0.25±0.06比1.00±0.10,t=-12.862,P=0.000),双荧光素酶报告基因检测明确了其靶向机制(0.22.±0.03比1.00±0.09,t=-16.444,P=0.000).结论 miR-563能够明显促进OPLL患者后纵韧带原代细胞的成骨分化,其作用与靶向抑制SMURF1相关.