鸭病毒性肝炎病毒VP3基因的克隆与表达

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提取鸭肝炎病毒RNA作为模板,进行RT—PCR扩增,得到723bp的VP3基因,将纯化的VP3基因片段与pMD18-T载体进行连接,构建DHVVP3基因克隆重组质粒。然后定向插入到pET-32a(+)表达载体,筛选获得原核表达载体pET-32a—VP3。用IPTG诱导表达,经SDS—PAGE电泳和Westernblot分析表明,VP3蛋自得到正确表达,其分子量为47.1ku,表达的蛋白能与鸭肝炎阳性血清发生特异性反应。
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