内化素(internalin)作为细菌表面蛋白是细菌侵入上皮细胞、肝细胞等非吞噬细胞并被宿主细胞内化的重要因子。本项目克隆了无乳链球菌internalin基因(GenBank登录号: MN265365)，该基因全长2 160 bp，编码719个氨基酸，理论分子量为80.38 kD，等电点为6.73，没有信号肽和跨膜结构域，定位在细胞膜上。序列分析发现该蛋白存在1个组氨酸三聚体超家族、1个LRR超家族结构和1个未知功能的DUF超家族。系统进化树分析显示，鱼源无乳链球菌internalin与链球菌属关系最近，聚为一支。SDS-PAGE电泳结果显示，pET-internalin重组蛋白经IPTG诱导后成功表达，分子量约为100 kD。对影响表达的诱导时间、IPTG浓度、诱导温度进行了优化，表明在28 ℃，0.4 mmol/L IPTG诱导6 h时，可大量表达pET-internalin可溶性蛋白。经纯化后重组蛋白条带单一，表明纯化效果较佳。该结果可为进一步制备无乳链球菌internalin多克隆抗体和功能研究奠定基础。