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目的
评价氢气对脓毒症小鼠肠组织Ras同源基因(Rho)/Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。
方法雄性ICR小鼠64只,体重20~25 g,6周龄,采用随机数字表法,将其分为4组(n=16):假手术组(SH组)、氢气组(H2组)、脓毒症组(S组)和脓毒症+氢气组(S+H2组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型。于CLP术后1和6 h时H2组和S+ H2组分别吸入2%氢气1 h。于CLP术后20 h时取8只小鼠,向胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FITC-右旋糖酐),4 h后心脏穿刺取血样,测定血清FITC-右旋糖酐的浓度。于CLP术后24 h时取8只小鼠,取血液、肝脏、脾脏和肾脏进行细菌培养,观察菌群移位情况;取小肠组织,透射电镜下观察肠上皮细胞超微结构,光镜下观察肠组织病理学改变并进行评分,采用Western blot法测定肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达水平。
结果与SH组比较,S组和S+H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分升高,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位增加,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达上调(P<0.05),H2组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,S+H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分降低,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位减少,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达下调(P<0.05),肠组织病理学损伤减轻。
结论氢气减轻脓毒症小鼠肠损伤的机制与抑制Rho/ROCK信号通路激活有关。