TaqMan荧光定量PCR技术快速检测霍乱弧菌方法的建立

来源 :中国卫生检验杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanhongsheng1982
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目的:建立特异、灵敏、快速的TaqMan荧光定量PCR方法用于快速检测霍乱弧菌。方法:根据GenBank上的霍乱毒素(cholera toxin,CT)基因序列,在其保守区域设计特异性引物与TaqMan探针,并对荧光定量PCR体系与反应条件进行优化,同时验证方法的特异性、敏感性和重复性。结果:本方法对霍乱弧菌的检测具有高度特异性,与副溶血性弧菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、大肠埃希菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等均无交叉反应;检测灵敏度达10cfu/ml;反应体系具有很高的稳定性;整个操作过程仅需2h。结
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