细鳞鱼温和气单胞菌LAMP检测方法的建立

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在对野生细鳞鱼保护和驯养繁育工作中发现其出现厌食独居、水中打转、体表溃疡和肝肾脏出血症状,从患病鱼体内分离得到1株细菌,经过生理生化鉴定和16SrRNA测序确定该菌株为温和气单胞菌(Aeromonssobria),在此基础上利用环介导恒温扩增技术(LAMP)建立该菌的快速检测方法.选用管家基因zipA作为靶基因,设计筛选出一套最佳引物,使用25 μL的优化体系,提取几种常见水产致病菌株DNA进行特异性分析,以10倍稀释法进行LAMP灵敏性试验,确定最低检测DNA浓度为1.663×10-9ng/pL.试验表明建立的温和气单胞菌LAMP检测方法可及早发现感染细菌,为阻止细鳞鱼疫情暴发和细鳞鱼驯化带来保障.
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