重组苏云金芽孢杆菌丙酮酸脱氢酶克隆及表达条件的优化

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根据Bcl4579丙酮酸脱氢酶基因序列设计引物,从苏云金芽孢杆菌BMB171菌株总DNA中扩增得到相应的丙酮酸脱氢酶基因DNA片段。将DNA片段装载到大肠杆菌构建pET—E1表达系统,再通过优化重组菌的表达条件获得有生物活性的丙酮酸脱氢酶。结果表明,pET—E1表达系统构建获得成功;优化的表达条件如下:培养基为TB+M9(体积比1:1)、起始菌体密度OD600为4~5.5、诱导剂IPTG浓度为0.04mmol·L^-1。
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