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研究miRNA-34a过表达对4种人宫颈癌细胞放射敏感性的影响。
方法运用脂质体2000转染试剂盒将pGenesil-1-miRNA-34a表达质粒转染宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa和CaSki，通过G418筛选构建过表达miRNA-34a宫颈癌细胞系(miRNA-34a/C33A、miRNA-34a/HeLa、miRNA-34a/SiHa和miRNA-34a/CaSki)。细胞经不同剂量60Co γ射线照射；运用TaqManRT-PCR和蛋白印迹法测定细胞中miRNA-34a表达；运用MTT法和克隆形成实验分别测定细胞增殖抑制率和克隆形成能力，流式细胞仪测定细胞凋亡率和蛋白印迹法测定细胞凋亡相关蛋白表达变化。
结果宫颈癌细胞系中miRNA-34a表达量显著高于阴性对照组(P<0.05)，过表达miRNA-34a宫颈癌细胞增殖抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05)，细胞克隆形成率显著低于阴性对照组(P<0.05)。流式细胞仪结果显示过表达miRNA-34a宫颈癌细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。蛋白印迹法结果显示4 Gy＋过表达miRNA-34a细胞中cleaved caspase 9和cleaved PARP蛋白表达量高于过表达miRNA-34a细胞。
结论本研究成功构建miRNA-34a过表达宫颈癌细胞系，miRNA-34a过表达增强宫颈癌细胞放射敏感性，其机制与激活细胞凋亡通路有关。