表达禽流感病毒血凝素基因的重组禽痘病毒的构建

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为构建表达禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组禽痘病毒,将禽痘病毒启动子LP2EP2驱动的H7亚型AIV HA基因cDNA和大肠杆菌LacZ基因插入禽痘病毒疫苗株F-017的复制非必需区。经蓝班筛选后,对重组病毒又进行了3次蚀斑克隆。以不同代次重组禽痘病毒核酸为模板,利用H7亚型AIV HA基因特异的引物进行聚合酶链式反应,均扩增出1条特异的1.7kb DNA条带。收集不同代次的重组禽痘病毒细胞培养物进行免疫斑点试验,均检测到HA蛋白,表明H7 HIV HA在重组禽痘病毒中获得了成功表达
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