下调PKR基因对胰腺细胞AR42J增殖、凋亡的影响及机制

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liaotianeryi
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目的:探讨下调PKR基因对大鼠胰腺腺泡细胞AR42J增殖、凋亡的影响及机制。方法:利用雨蛙素作用AR42J细胞建立急性胰腺炎细胞模型,在细胞模型中通过慢病毒载体下调PKR基因为实验组,对照病毒转染组为对照组。平板克隆形成和CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qRT-PCR及流式细胞术分别检测核因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)通路关键基因表达变化。结果:相较于对照组,实验组中NF-κB通路关键基因NF-κB、肿瘤坏死因了-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、iNOS相对表达量为0.45±0.08、0.26±0.05、0.51±0.25、0.38±0.04,相对表达下降(t=7.64,t=16.41,t=6.67,t=10.15,均P<0.05);实验组细胞克隆数为(275.33±7.02)个,对照组克隆数为(36.00±4.00)个,克隆形成能力明显增强(t=51.29,P=0.00);CCK-8数据:在24 h、48 h、72 h,实验组细胞增殖率为(25.00±3.00)%、(50.33±4.04)%、(62.33±4.51)%,对照组为(12.33±1.53)%、(17.00±1.00)%、(24.00±2.00)%,实验组增殖能力明显增强(t=6.52,t=13.87,t=13.46,均P<0.05)。实验组和对照组中细胞早期凋亡率分别为(6.2±0.6)%和(13.4±0.9)%,实验组凋亡明显减少(t=11.53,P=0.00);晚期凋亡率分别为(4.1±0.2)%和(12.2±0.5)%,实验组凋亡明显减少(t=26.05,P=0.00)。结论:下调PKR基因可以抑制NF-κB通路减缓细胞炎症反应,致AR42J细胞凋亡减少、增殖能力增强。
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