观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对高糖培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)的免疫调节作用。
方法利用复合培养体系将hUCMSC加入Transwell系统上层小室，下室加入含有25 mmol/L的葡萄糖及RF/6A细胞；将hUCMSC按照1∶1比例与RF/6A细胞共培养。实验分为对照组、高糖组及hUCMSC与高糖共培养组进行，3组RF/6A细胞分别采用Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)/F12完全培养液、DMEM/25 mmol/L D-葡萄糖完全培养液、hUCMSC与25 mmol/L D-葡萄糖完全培养液进行培养。采用噻唑蓝比色法检测共培养后RF/6A细胞的增生活力；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RF/6A细胞中叉头蛋白(Foxp3)的相对表达量；酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素(IL)-17的浓度。
结果培养后第1天，对照组、高糖组及hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞存活率比较，差异无统计学意义(F＝0.030，P>0.05)。培养后第3、7天，高糖组RF/6A细胞存活率较对照组明显降低，差异有统计学意义(t＝36.072、27.890，P<0.05)；hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞存活率较高糖组明显提高，差异有统计学意义(t＝13.280、19.650，P<0.05)。Western blot检测结果显示，培养后第7天，高糖组RF/6A细胞中Foxp3蛋白相对表达量较对照组明显下降，差异有统计学意义(t＝7.826，P<0.05)；hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞中Foxp3蛋白相对表达量较高糖组明显提高，差异有统计学意义(t＝19.936，P<0.05)。ELISA检测结果显示，培养后第7天，高糖组、hUCMSC与高糖共培养组细胞培养上清液中IL-17浓度较对照组明显升高，差异有统计学意义(F＝1 267.503, P<0.05)。hUCMSC与高糖共培养组细胞培养上清液中IL-17浓度较高糖组明显下降，差异有统计学意义(t＝17.386，P<0.05)。
结论hUCMSC能提高被高糖抑制的RF/6A细胞增生活力，可通过调控Foxp3、IL-17表达来平衡修复RF/6A细胞。